ATCC細(xì)胞株是通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的培養(yǎng)物,也就是說,
ATCC細(xì)胞株是用單細(xì)胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法,由單細(xì)胞增殖形成的細(xì)胞群。細(xì)胞株的特殊性質(zhì)或標(biāo)志必須在整個培養(yǎng)期間始終存在。
ATCC細(xì)胞株是用單細(xì)胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法,由單細(xì)胞增殖形成的細(xì)胞群。細(xì)胞株的特殊性質(zhì)或標(biāo)志必須在整個培養(yǎng)期間始終存在。原代培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后即為細(xì)胞系,由原先存在于原代培養(yǎng)物中的細(xì)胞世系所組成。如果不能繼續(xù)傳代,或傳代次數(shù)有限, 可稱為有限細(xì)胞系,如可以連續(xù)培養(yǎng), 則稱為連續(xù)細(xì)胞系,培養(yǎng)50代以上并無限培養(yǎng)下去。 所以細(xì)胞株是通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得的具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志的培養(yǎng)細(xì)胞。從培養(yǎng)代數(shù)來講,可培養(yǎng)到40-50代。細(xì)胞株的特殊性質(zhì)或標(biāo)志必須在整個培養(yǎng)期間始終存在。對于人類腫瘤細(xì)胞,在體外培養(yǎng)半年以上,生長穩(wěn)定,并連續(xù)傳代的即可稱為連續(xù)性株或系。
購買ATCC細(xì)胞株需要考慮哪些因素?
1、細(xì)胞株的生物等級,由于有些細(xì)胞株及菌株屬于管制品,所以從國外購貨比較麻煩。
2、在購買國外細(xì)胞株時,需交待國外加比較多的干冰(一般在13公斤以上,采用比較密封的泡沫盒加套紙箱。
3、報關(guān)時盡量提供比較充足的證明材料,以免擔(dān)擱時間而導(dǎo)致干冰揮發(fā)完細(xì)胞株死亡,甚至于被退回給發(fā)貨人。
4、如果通過國外細(xì)胞株在國內(nèi)的代理商購買的話,合同中需注明以下一些內(nèi)容:
a. 明確的到貨時間,這個時間需注明的是工作日,還是普通日。
b. 采用什么樣的運(yùn)輸方法?
c. 如果屬于技術(shù)外的因素而細(xì)胞株無法培養(yǎng)活,供方需負(fù)什么樣的責(zé)任?
d. 細(xì)胞株的詳細(xì)資料,以及細(xì)胞株的代數(shù),其中,ATCC的細(xì)胞株一般都在幾十代,這個需要與國外確認(rèn),IST-Banca可與他們的代理商索取詳細(xì)資料!
e. 需在合同中注明*,避免相關(guān)公司魚龍渾雜,從國外購買回一株細(xì)胞株,經(jīng)過培養(yǎng)傳代后,同時供應(yīng)給幾個人;一般國外進(jìn)口的細(xì)胞株都會有原裝的凍存管,而且每一支凍存管上都會有批號,而且每次的批號都不一樣。
f. 在決定購買細(xì)胞株之前,必須仔細(xì)閱讀他們的培養(yǎng)信息,所謂“細(xì)胞株未到,培養(yǎng)基先行一步”。
g. 在接到細(xì)胞株后,要求供應(yīng)公司的人員現(xiàn)場參與,從而用于確認(rèn)責(zé)任。
h. 在培養(yǎng)前,請確認(rèn)您的二氧化碳培養(yǎng)箱二氧化碳濃度的準(zhǔn)確性,國外的細(xì)胞株建議用進(jìn)口的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,比如:orange,corning, falcon品牌的培養(yǎng)瓶。
i. 詢問你的代理商或者經(jīng)銷商,接到細(xì)胞株后是否需要離心置換出DMSO,因?yàn)橛行┘?xì)胞廠家建議不要離心,他們會認(rèn)為離心而導(dǎo)致的碎片比DMSO產(chǎn)生毒性的害處更大,如果可以離心,轉(zhuǎn)速不要過高,一般都在1000轉(zhuǎn)以下,此處需要注意,因?yàn)橛械墓緯眠@一點(diǎn)來拒絕索賠!
j. 培養(yǎng)基的服務(wù),仔細(xì)與供應(yīng)商確認(rèn)培養(yǎng)基的品牌及份量,以免供應(yīng)商以些理由來推翻你索賠的理由。
k. 在細(xì)胞株復(fù)蘇時,一定要先想好步驟再做,一步一步來做,避免導(dǎo)致操作中的污染,復(fù)蘇是一個非常重要的步驟,往往容易導(dǎo)致污染,然后為污染所導(dǎo)致的雜質(zhì)而傷透腦筋。