怎么樣的ATCC細胞株才能稱得上好的

　　一個好的ATCC細胞株有多方面要求：
　　1. 產(chǎn)量高，高的產(chǎn)量直接降低固定投資和單次生產(chǎn)成本。
　　2. 產(chǎn)品質(zhì)量符合要求。產(chǎn)品質(zhì)量影響藥效和安全性。
　　3. 穩(wěn)定性。產(chǎn)量和質(zhì)量在生產(chǎn)傳代過程中不應有大的改變。一般認為在60-90PDL產(chǎn)量變化不超過30%是可以接受的。
　　4. 與生產(chǎn)過程的相容性。細胞株需要適合大規(guī)模生產(chǎn)放大。
　　5. 合規(guī)。ATCC細胞株的構(gòu)建過程應避免接觸或使用動物來源成分或其它可能影響安全性的成分， 保證單克隆性（clonality）以及整個過程的實驗記錄完整。
　　ATCC細胞株無菌操作注意事項
　　1.操作前要洗手，進入超凈臺后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。
　　2.點燃酒精燈，操作在火焰附近進行，耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼，金屬器械燒灼時間不能太長，以免退火，并冷卻后才能夾取組織，吸取過營養(yǎng)液的用具不能再燒灼，以免燒焦形成碳膜。
　　3.操作動作要準確敏捷，但又不能太快，以防空氣流動，增加污染機會。
　　4.不能用手觸已消毒器皿的工作部分，工作臺面上用品要布局合理。
　　5.瓶子開口后要盡量保持45℃斜位。
　　6.吸溶液的吸管等不能混用。
　　ATCC細胞株的細胞處理：
　　1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)隔夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)隔夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
　　2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
　　對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
　　方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
　　方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
　　3）ATCC細胞株的細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM條件下離心5分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。